Chồi phát hoa Phalaenopsis nuôi cấy in vitro thường bộc lộ 3 trạng thái là chồi ngủ, chồi sinh dưỡng và chồi sinh sản. Phân viện Sinh học Đà Lạt đã tổ chức triển khai các thí nghiệm điều tra khảo sát tác động ảnh hưởng của địa điểm nguồn mẫu trên chồi phát hoa, độ ẩm nuôi cấy và nồng độ BA trong môi trường thiên nhiên lên những trạng thái sinh trưởng. Chúng tôi cũng khảo sát những điều kiện cảm biến mô sẹo & sự hình thành phôi vô tính của Phalaenopsis.
* Nguồn mẫu: Là giống Lan Hồ Điệp lai Phalaenopsis amabilis 5–6 năm tuổi trồng ở trong nhà lưới. Tách phát hoa làm nguồn mẫu khi cây bắt đầu nở hoa. Mẫu sau lúc đã xử lý được cấy trên môi trường xung quanh VW (Vacin và Went, 1949) có bổ trợ 2% sucrose.
* Nguồn mẫu: Là giống Lan Hồ Điệp lai Phalaenopsis amabilis 5–6 năm tuổi trồng ở trong nhà lưới. Tách phát hoa làm nguồn mẫu khi cây bắt đầu nở hoa. Mẫu sau lúc đã xử lý được cấy trên môi trường xung quanh VW (Vacin và Went, 1949) có bổ trợ 2% sucrose.
* Tác dụng thực hiện:
(1) Điều tra khảo sát ảnh hưởng tác động của độ ẩm đối với quy trình tiến độ nuôi cấy: Tiến hành thí nghiệm nuôi những đoạn cắt chồi có xuất xứ từ những vị trí khác nhau trên môi trường VW & đặt ở các nhiệt độ không giống nhau. Hiệu quả ghi nhận sau 90 ngày nuôi cấy như sau:
- 1 số chồi vẫn duy trì trạng thái ngủ ở tất cả các độ ẩm điều tra khảo sát & vị trí nguồn mẫu cấy trên chồi phát hoa càng cao thì mật độ chồi ngủ càng nhiều.
- Về ảnh hưởng tác động của độ ẩm, ở độ ẩm 20°C, 67% chồi nuôi cấy tạo nên chồi sinh sản. Còn ở 25°C, 76% chồi tạo ra chồi sinh dưỡng.
2) Khảo sát điều tra tác động của BA lên sự nẩy mầm của chồi bên trong tiến trình nuôi cấy in vitro ban đầu:
- Tỷ lệ nẩy chồi trong môi trường VW có bổ trợ BA tựa như với trên môi trường có bổ sung thêm nước dừa. Nồng độ BA càng cao thì mật độ chồi nẩy mầm càng tăng. Khi nồng độ BA từ 5-10 mg/l thì đa số những chồi nẩy mầm và tăng trưởng sinh dưỡng. Mặc dù thế, các chồi sinh dưỡng có lá phi lý.
- Chồi được nuôi cấy ở 20°C hoặc 28°C trên môi trường bổ trợ 2,5 mg/l BA có tỷ lệ chồi không thể nẩy mầm là cực thấp.
- Tỷ lệ nẩy chồi trong môi trường VW có bổ trợ BA tựa như với trên môi trường có bổ sung thêm nước dừa. Nồng độ BA càng cao thì mật độ chồi nẩy mầm càng tăng. Khi nồng độ BA từ 5-10 mg/l thì đa số những chồi nẩy mầm và tăng trưởng sinh dưỡng. Mặc dù thế, các chồi sinh dưỡng có lá phi lý.
- Chồi được nuôi cấy ở 20°C hoặc 28°C trên môi trường bổ trợ 2,5 mg/l BA có tỷ lệ chồi không thể nẩy mầm là cực thấp.
- Chồi ra khỏi trạng thái ngủ khi có bổ sung BA, nó cũng chịu ràng buộc của vị trí chọn trên cuống hoa & nhiệt độ nuôi cấy. Lá non của chồi sinh dưỡng cải tiến và phát triển in vitro, dưới tác động ảnh hưởng kích thích của BA, được sử dụng làm vật liệu khởi đầu cho việc nhân giống vô tính để thu nhận được PLB, kế tiếp là cây con.
(3) Điều tra khảo sát sự cảm ứng mô sẹo: Nuôi những đoạn cắt mô lá để thu PLB, những PLB này được cắt đôi & cấy chuyền sang môi trường thiên nhiên mới trong 2 tháng. Môi trường xung quanh nuôi có bổ sung phối hợp 2,4D, BA và nước dừa với nồng độ 200 mg/l môi trường xung quanh, thay đổi các nồng độ sucrose không giống nhau.
Công dụng chứng nhận đã cho chúng ta biết có nhiều mô sẹo hình thành từ PLB trên môi trường thiên nhiên có sucrose. Nếu môi trường có bổ trợ nước dừa hoặc các chất điều hoà đi lên thì kích cỡ mô sẹo không hề nhỏ & có màu vàng xanh, đặc biệt tốt trên môi trường xung quanh kết hợp 2,4–D & BA với nồng độ phù hợp.
(3) Điều tra khảo sát sự cảm ứng mô sẹo: Nuôi những đoạn cắt mô lá để thu PLB, những PLB này được cắt đôi & cấy chuyền sang môi trường thiên nhiên mới trong 2 tháng. Môi trường xung quanh nuôi có bổ sung phối hợp 2,4D, BA và nước dừa với nồng độ 200 mg/l môi trường xung quanh, thay đổi các nồng độ sucrose không giống nhau.
Công dụng chứng nhận đã cho chúng ta biết có nhiều mô sẹo hình thành từ PLB trên môi trường thiên nhiên có sucrose. Nếu môi trường có bổ trợ nước dừa hoặc các chất điều hoà đi lên thì kích cỡ mô sẹo không hề nhỏ & có màu vàng xanh, đặc biệt tốt trên môi trường xung quanh kết hợp 2,4–D & BA với nồng độ phù hợp.
(4) Điều tra sự dựng nên PLB: Các mô sẹo cảm ứng từ PLB hay từ lá được nuôi trên môi trường thiên nhiên VW có bổ sung nước dừa để tái thu nhận PLB sau 8 tuần.
- Mô sẹo được nuôi trên môi trường có sucrose liên tiếp cải tiến và phát triển, trong khi mô sẹo cấy chuyền sang môi trường thiên nhiên không có sucrose chuyển sang greed color & tạo ra rất đông PLB.
- Quan sát mô không thấy có sự liên kết mạch giữa mỗi PLB & các mô khác. Như vậy PLB có nguồn gốc xuất xứ từ mô sẹo hoàn toàn có thể được xem như phôi vô tính. Những PLB này sau khi được chuyển qua môi trường xung quanh tái sinh cây sẽ dựng nên cây hoàn chỉnh
- Mô sẹo được nuôi trên môi trường có sucrose liên tiếp cải tiến và phát triển, trong khi mô sẹo cấy chuyền sang môi trường thiên nhiên không có sucrose chuyển sang greed color & tạo ra rất đông PLB.
- Quan sát mô không thấy có sự liên kết mạch giữa mỗi PLB & các mô khác. Như vậy PLB có nguồn gốc xuất xứ từ mô sẹo hoàn toàn có thể được xem như phôi vô tính. Những PLB này sau khi được chuyển qua môi trường xung quanh tái sinh cây sẽ dựng nên cây hoàn chỉnh














